发布单位：武汉思特进科技发展有限公司 发布时间：2022-6-13
样品预处理
在待测样品中，dna或rna通常都是被蛋白包裹缠绕，根据不同的细胞和组织样品的应用，可选择合适的预处理方法将靶---暴露：
内源性酶灭活：如果探针的检测是通过酶促法进行的，则样品内相应的内源性酶必须被灭活。如内源性的pod可通过含1%h2o2的---处理30min。如果检测酶为ap，可在底物溶液中加入左旋咪唑，ap检测的内源性背景一般来说比pod检测的低得多，因为在杂交过程中，样品中内源性ap酶的活性基本都丧失了。
rnase处理：在dna-dna杂交实验中，rnase的处理可去除内源性rna，增加实验的信噪比。在进行mrna为靶标的检测时，rnase处理的样品也可作为质控对照。通常的处理方式是将dnase-free的rnase溶解于2×ssc(100μg/ml)，样品在溶液中37℃处理60min。
在进行研究前，确定应用的探针类型。不同探针类型的优劣势请见上文描述。dna探针的制备包括了前期的dn---段分离纯化（或cdna的）和酶促探针标记，可选随机引物标记法和缺口平移法等。rna探针的制备包括了转录载体和转录法探针标记。寡核苷酸探针的制备要求先获得合成的寡核苷酸片段，再进行末端标记或加尾法探针标记。但无论采用何种标记探针及标记方法，对探针标记效果需进行终的评估，并准确计算探针浓度。
肝纤维化动物模型
模型概述：
1. 任何可引起肝损伤的因素长期、反复作用于，均可产生肝细胞变性、坏死，继而肝和纤维组织，导致肝纤维化。
2. 已有化学性损伤、性、生物学、酒精性和营养性肝纤维化模型。每种方法因致病因素不同，给药途径不同，产生的机理、纤维化出现早晚、稳定性、出现率、重复性及机体自然患病过程相似程度等都不尽相同。
