发布单位:武汉思特进科技发展有限公司 发布时间:2022-8-18
动物实验检测的取材要求介绍:
实验小鼠取材要求
采血后,立即将---放入1.5ml离心管(不需加抗凝剂或防腐剂)。让---在室温下静置30-60分钟。在相对离心力(relativecentrifugalforce,rcf)14000g下离心血样10-15分钟,用移液管吸取分离,并转移到干净的离心管中。可将样本在14000g下再离心2-3分钟,以分离任何剩余的红细胞。将分离好的转移到干净的离心管中。
原位杂交过程
杂交前可进行预杂交,以防止较高的背景染色。预杂交条件与杂交条件相同,只是预杂交液中不含探针和---葡聚糖。
靶dna的变性(对mrna的原位杂交无需此步)
样品dna的变性在dna-dna杂交检测中是必须的步骤,但同时可能会造成样品形态学的部分破坏,此步是实验中需要优化的一个步骤。常用的变性方法为碱变性和热变性,实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得佳条件。
如使用热变性方法,可在杂交时将探针的变性和样品dna变性同步进行:将样品和探针溶液加盖盖玻片,置于烘箱80℃变性,染色体dna样品处理2min,后冷却至37℃进行杂交。组织样品dna的变性时间可增加至80℃10min。