亚细胞定位-思特进(商家)_武汉其它电感

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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。

泛素-蛋白酶体通路在植物---反应(包括反应)中发挥重要作用，泛素连接酶(ubiquitin ligase， e3)则是参与这一过程的重要组分。本研究旨在通过和分析与马铃薯晚疫病抗性相关的泛素连接酶家族中的成员，初步揭示这类基因在马铃薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的调控作用，或它们在马铃薯防御晚疫病菌侵染的信号传导网络中的作用，为进一步深入开展抗性机理研究奠定基础。本实验室从晚疫病---的马铃薯水平抗性材料构建的cdna---中筛选出两个与avr9/cf-9 rapidly elicited protein (acre，具有泛素连接酶e3活性)基因有---同源性的est片段(10-a12和08-e12)。本研究中，我们了这两个est片段所代表的基因，strfp和stpub，并研究了其生物学功能。 strfp基因的全长cdna为1354 bp，包含一个789 bp的开放阅读框(orf)，编码262个---酸，含有高度保守的ring-h2型ring指结构域、跨膜结构域和gld结构域，是一个新的马铃薯atl (arabidopsis toxico para levadura)蛋白。strfp基因位于马铃薯第3条染色体上，不含内含子。马铃薯基因组中可能有1-2个strfp基因拷贝或与之同源性高的基因。利用洋葱表皮细胞进行的strfp-gfp融合蛋白亚细胞定位结果显示，strfp在细胞膜上或膜外表达。

植物中，wrky转录因子家族成员众多，近年来成为植物分子生物学研究的---。由于其编码蛋白的n-端具有高度保守的wrkygqk---酸残基序列，人们将其命名为wrky。其保守的wrky结构域能与下游基因启动子w-box特---结合，从而调控下游基因的表达水平。目前，亚细胞定位，诸多研究结果表明，wrky转录因子在植物中参与生物---、非生物---、种子发育、种子休眠与萌芽、形态建成、衰老等方面的表达调控。前人研究表明，拟南芥转录因子atwrky70的表达水平受------，与该信号途径当中的抗病反应相关联。与型相比，超量表达atwrky70的拟南芥植株对青花菜褐茎病(hyaloperonospora parasitica)、假单胞菌(pseudomonas syringae)等---病表现出了---的抗性，而对欧文氏软腐菌(erwinia amylovora)等---病则更敏感。同时发现，atwrky70对植物的衰老起负调控作用。序列对比分析表明，在杨树当中，ptwrky89与atwrky70高度同源，然而，对于ptwrky89生物学功能的研究至今尚未---。本中，我们首先了ptwrky89基因，并对其进行了组织表达分析及亚细胞定位，进一步构建载体转化毛白杨，在---植株中分析了该转录因子在病害---生理过程中的调控作用。

分别用70%---和灭菌蒸馏水清洗金粉（直径为1 μm），加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液，取100 μl 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中，边振荡边加入10 μl pcambia2301-gamyb2-gfp质粒，逐步加入40 μl 0.1 mol·l-1 亚精胺和100 μl2.5 mol·l-1 cacl2，振荡混匀。基因枪gds-80轰击时---气罐的气压为1 300 psi，取10 μl dna 包裹好的微粒悬浮液加到基因枪中央，进行轰击，之后放置25℃避光过夜培养，使用confocallaser激光共---显微镜观察。

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