亚细胞定位-武汉思特进科技公司

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    2020-8-21

夏经理
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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。




谷氨---合成酶(gs; ec 6.3.1.2)是植物n素同化途径中较为关键的催化酶之一,亚细胞定位,被称为是植物中无机态n转化为有机态n的“门户”,对植物n素吸收、同化和利用效率(nitrogen use efficiency)有着---重要的影响。---植物中的gs同工酶主要分为两类:胞质型gs1主要同化从土壤吸收的初级氨及再同化从植物体内各个n循环途径所释放的氨;质体型gs2同化由no3--n还原而来及光呼吸过程所释放的氨。n素供应对甜瓜的生长发育、果实的产量和品质形成有非常重要的影响,目前甜瓜n素代谢研究还停留在n营养生理与果实品质及产量层面,在分子机理水平的研究---很少,尤其是对与n素同化和利用效率紧密相关的gs酶基因的研究还是空白。因此,本文以甜瓜作为对象,在从甜瓜中出胞质型gs基因m-gs1的基础上,对m-gs1及课题组到的甜瓜质体型gs基因m-gs2的基因组拷贝数、表达产物的亚细胞定位及生化特性、在甜瓜中的表达调控特征等进行了研究和对比分析,从基因、蛋白质和细胞水平对甜瓜gs基因进行了系统的功能验证和鉴定,开展了甜瓜n营养代谢的分子生理研究;进而在植株水平研究m-gs1在---超量表达后提高植株n素同化效率的潜能,为甜瓜gs基因的应用、利用gs基因改良植物n素利用效率的研究提供新的材料和依据。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。




多胺作为一种多聚阳离子,在基因表达、蛋白活性等多层面调节细胞功能。多胺转运蛋白能够特---介导多胺类物质跨膜运输,在调节多胺浓度、调控抗性基因表达、维持mrna水平、增强植物抗逆性等方---有重要功能。目前,已知拟南芥(arabidopsis thaliana)lhr1基因编码质膜多胺转运蛋白atput3,控制多胺的吸收,参与植物热---早期反应中的分子调控过程,但水稻中(oryza sativa),多胺参与植物热---早期反应的具体分子机制尚不明确。通过序列对比,发现水稻os02g47210和os03g37984是拟南芥atput3的功能同源基因。为了初步阐明水稻多胺转运蛋白lhr1在热---早期防御反应及提高植物耐热性上的功能,本研究利用生物信息学、生化与分子生物学实验、遗传学等手段对水稻lhr1同源基因的功能进行初步研究,结果如下:1.了水稻oslhr1(os03g37984.1、2、3和os02g47210)基因全长cds,并对该基因编码的蛋白质进行有效的生物信息学分析,结果显示:os03g37984有5种不同的剪切方式,编码5种osput3蛋白。


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分别用70%---和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μl 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μl pcambia2301-gamyb2-gfp质粒,逐步加入40 μl 0.1 mol·l-1 亚精胺和100 μl2.5 mol·l-1 cacl2,振荡混匀。基因枪gds-80轰击时---气罐的气压为1 300 psi,取10 μl dna 包裹好的微粒悬浮液加到基因枪中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用confocallaser激光共---显微镜观察。


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