武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。
目的构建通用型植物gfp标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内定位对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种gfp标签蛋白质表达载体,分别在gfp的n和c端预留位点,亚细胞定位找哪里,以目的基因。利用该基因载体,分别内切酶fok i的切割结构域与ms2噬菌体外壳蛋白mcp的串联蛋白(fok i:mcp:fok i,fmf)至gfp的n和c端,得到fmf与gfp的融合蛋白gfp:fmf和fmf:gfp,其中fmf的n端带有细胞核定位信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察gfp荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的基因和gfp的表达载体p er35gfp-fmf和p er35fmf-gfp。激光共---结果显示侵染了只含gfp载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到gfp的绿色荧光,而侵染了含核定位信号fmf:gfp和gfp:fmf 2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞定位,具有简单、和通用性的特点。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。
gamyb2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因枪轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共---显微镜下进行观察,从图a 中可以看出对照gfp空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图b 中发现gamyb2-gfp 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。
stathmin蛋白是一个与细胞的增殖和分化密切相关的蛋白分子,在细胞内多条信号通路中作为中间蛋白发挥作用。目前,---对stathmin蛋白的研究集中在脊椎动物,而无脊椎动物中有关stathmin蛋白的研究则相对较少。本研究从家蚕蛹cdna---中获得一条家蚕stathmin...
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