亚细胞定位-思特进(商家)

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    2020-10-16

夏经理
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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。




以苎麻优良品系5041-3子叶作为受体,利用根癌农介导法进行了绿色荧光蛋白基因的遗传转化研究,农菌株为eha105,重组质粒为pbinm-gfp5-er。经农浸染后的子叶外植体经过共培养、选择培养、伸长培养和生根培养后再生出抗性植株,对抗性植株的再生过程进行了gfp荧光检测,结果表明,gfp基因能在苎麻中---表达,证明gfp基因能够在苎麻遗传转化中得到应用。对抗性植株的southern杂交检测证实外源基因已整合到苎麻基因组中。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。





目的研究1个白木香倍半萜合酶(ass)的亚细胞定位,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣。方法从白木香愈伤组织中提取总rna,采用特异引物rt-pcr方法倍半萜合酶ass基因,并连接于pezs-nl载体和pfgc5941gfp改造载体上,分别构建pfgc5941-gfp-ass、pezs-nl-ass-gfp 2种植物表达载体,分别利用根癌农侵染叶片、基因枪轰击洋葱表皮细胞、peg转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共---显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(gfp)融合蛋白的亚细胞定位。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ass基因与gfp的融合蛋白产物在叶片中定位于胞质,在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核,白木香原生质体中定位于胞质和质体。结论 ass基因在白木香原生质体胞质及质体定位;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞定位可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。

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大豆是重要的油料作物和植物蛋白质资源,在食品工业和农业生产中占有重要---。大豆花叶---病分布非常广泛,是一种害,它---影响大豆产量和外观品质。目前主要通过适当改变播种时期、选用抗病品种、防蚜等措施来降低大豆花叶---(smv)对大豆产量的影响,---从遗传工程角度来探索抗smv途径的还很少。类甜味蛋白(thaumatin-like proteins,tlp)是第5类植物病程相关蛋白,在离体条件下具有很强的---活性。以往关于类甜味蛋白的抗病研究都限于---,本研究探讨了其与花叶---抗性之间的相关性。gmtlp是本研究从大豆品种科丰1号中利用smv---的双向电泳技术分离的类甜味蛋白编码基因,亚细胞定位,在大豆中存在两个拷贝,分别命名为gmtlp1和gmtlp2。本文对gmtlp1在植物中的表达及功能进行了初步研究。研究结果如下:1实时荧光定量pcr结果显示,在smv---4h、8h、24h、48h时,gmtlp1基因在转录水平上的表达量明显上升,说明在mrna水平上该基因是响应smv---的,并且响应模式为双峰模式。 2半定量rt-pcr结果显示,gmtlp1在大豆根、茎、叶、荚中均有表达,只是荚中表达量相对低一些。3构建绿色荧光蛋白融合表达载体,利用根癌农法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达。


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