武汉思特进公司-亚细胞定位

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    2020-11-13

夏经理
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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。




以生菜、洋葱、萝卜为试材,用转人植物表达载体psh-ngn的根癌农eha105分别 采用真空渗透法和直接注射法瞬时表达chifn-γ蛋白,研究其宿主植物和方法。结果显示,真空渗透法和直接注射法在瞬时表达效率上差异不大,真 空渗透操作上更简便、更易掌握;新鲜市售生菜,亚细胞定位,真空抽气25min,共培养3d,瞬时表达效率达到3645pg/g,chifn-γ 蛋白得到表达。


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f-box蛋白通过在upp(泛素-蛋白酶体途径)中特异识别底物蛋白而参与细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、信号转导等生命活动。很多研究结果表明f-box蛋白通过scf复合体调节多种的信号转导途径,如iaa、ja、ga和乙烯的信号传导,并且与植物对非生物---的响应有很大的关系。故其对植物抗逆性研究有重要意义。鹰嘴豆是---大豆类作物,主要生长在干旱和半干旱地区。它具有生育期短,基因组小的特点。经过长时间的进化和对---环境的适应,鹰嘴豆具有了丰富的耐旱、耐低温和耐盐碱等抗逆基因,因此具有其自身的优势来研究植物的抗逆机制。目前,鹰嘴豆在分子生物学方面的研究较为少。 本研究从est库中挑选到两个f-box蛋白基因在干旱---下表达,采用race技术其全长,并对目的基因进行了初步的生物信息学分析和转录水平的表达谱分析,旨在为进一步揭示鹰嘴豆f-box蛋白在植物的生长发育及在逆境信号传导中的作用奠定理论基础。 carf-box1基因的开放阅读框(orf)长1093bp,编码一条345个---酸残基的多肽,含有f-box结构域和kelch结构域。其理论等电点为5.38,分子量为38.37kda。carf-box1基因不含有内含子。荧光定量pcr分析表明,carf-box1在鹰嘴豆的根、茎、叶、花、成熟豆和成熟荚中均有表达,在花中表达---。

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植物细胞壁抗降解屏障是---秸秆生物质资源化转化利用的关键因素,而木质纤维素的阿魏酸化是禾本科植物细胞壁抗降解屏障形成的重要分子基础。植物阿魏酰基转移酶(feruloyl transferase)是负责将阿魏酸从阿魏酰coa转移至阿拉伯木聚糖分子上的关键酶之一,在阿拉伯木聚糖与木质素的连接上起到关键作用,与植物细胞壁抗降解屏障的形成关系十分密切,因此对阿魏酰基转移酶基因开展研究将可以为禾本科能源植物开发利用以及农作物秸秆的再生利用提供新的思路。本文对禾本科模式植物二穗短柄草(brachypodium distachyon)中的一个可能的阿魏酰基转移酶基因bra1进行研究,其主要研究结果如下:1.以二穗短柄草成熟茎组织mrna为材料,采用rt-pcr技术得到了bra1(5g14720)基因的全长cdna序列,其序列大小为1369 bp,生物信息学分析表明该基因的开放阅读框(orf)编码443个---酸残基,其编码蛋白质的理论分子为48.45 kda。进一步的基因原核表达以及蛋白质谱分析也表明该基因的开放阅读框能正确编码一个bahd酰基转移酶蛋白,其分子量大小与理论值基本一致。2.bra1编码蛋白的---酸序列中包含有bahd酰基转移酶家族特有的hxxxd功能区以及dfgwg保守结构域,说明bra1基因是bahd酰基转移酶基因家族的一个成员。


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