思特进科技发展公司-洋葱亚细胞定位培养

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。

canz是can(calcineurin)基因的正义表达基因，是在真核生物中存在的一个ca2+及cam依赖的ser/thr蛋---酸酶，它包括一个催化亚基calcineurin a和一个ca2+结合亚基calcineurin b，其催化亚基calcineurin a活性受cam调节。本实验在筛选再生体系基础上，利用带有信号肽和cam结合肽的载体，以农为媒介将can基因导入中，预期过表达的融合蛋白将会被分泌到细胞外并与质外体cam相结合，抑制质外体cam的功能，从而构建出质外体cam的反义植株，观察质外体cam反义植株的表型改变，为进一步开展cam在植物生长发育过程中的功能研究提供基础。 研究结果如下： (1)以14-16d叶片为外植体，以ms为基本培养基，通过附加配方对比，筛选出适合材料再生的培养基配方：ms+iaa 0.5mg·l-1+6-ba 1.5mg·l-1为芽分化的培养基，1/2ms+naa0.1mg·l-1为生根培养基。 (2)用kan进行叶片抗性筛选。当kan浓度小于50mg·l-1时，叶片能正常分化出芽；当kan浓度为75mg·l-1时，叶片大多数白化；当kan浓度超过100mg·l-1时，洋葱亚细胞定位培养，芽分化停止。所以，以kan浓度100mg·l-1为叶片分化芽抗性筛选的临界浓度；而培养物根对较为敏感，kan 50mg·l-1为筛选临界值。