亚细胞定位-思特进

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    2020-12-8

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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。





由稻瘟菌(magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因为中心,探讨致病相关基因的种类及其功能,生理小种和致病基因的关系,致病基因的遗传分离和在群体中的转移规律等等,能够为水稻抗瘟性研究和稻瘟病化学---、生物---提供理论基础。 本研究利用在实验室已经建成的根癌农介导的稻瘟菌t-dna插入突变体库,挑选了7个致病力缺陷的突变体,提取基因组dna,pcr检测确认t-dna的插入。利用dw-acp-pcr(dna walking-annealing control primer-pcr)技术对t-dna右边界侧翼序列进行扩增,7个突变体都获得了特异条带。对这些特异条带进行并测序,其中5个测序成功,另外2个测序失败。将成功的序列与稻瘟菌基因组和ncbi数据库比对,发现1个为载体pcambia1300序列,4个与稻瘟菌的基因组相似性达93%~99%,认为是t-dna插入位点的侧翼序列。

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植物细胞壁抗降解屏障是---秸秆生物质资源化转化利用的关键因素,而木质纤维素的阿魏酸化是禾本科植物细胞壁抗降解屏障形成的重要分子基础。植物阿魏酰基转移酶(feruloyl transferase)是负责将阿魏酸从阿魏酰coa转移至阿拉伯木聚糖分子上的关键酶之一,在阿拉伯木聚糖与木质素的连接上起到关键作用,与植物细胞壁抗降解屏障的形成关系十分密切,因此对阿魏酰基转移酶基因开展研究将可以为禾本科能源植物开发利用以及农作物秸秆的再生利用提供新的思路。本文对禾本科模式植物二穗短柄草(brachypodium distachyon)中的一个可能的阿魏酰基转移酶基因bra1进行研究,其主要研究结果如下:1.以二穗短柄草成熟茎组织mrna为材料,采用rt-pcr技术得到了bra1(5g14720)基因的全长cdna序列,其序列大小为1369 bp,生物信息学分析表明该基因的开放阅读框(orf)编码443个---酸残基,其编码蛋白质的理论分子为48.45 kda。进一步的基因原核表达以及蛋白质谱分析也表明该基因的开放阅读框能正确编码一个bahd酰基转移酶蛋白,亚细胞定位,其分子量大小与理论值基本一致。2.bra1编码蛋白的---酸序列中包含有bahd酰基转移酶家族特有的hxxxd功能区以及dfgwg保守结构域,说明bra1基因是bahd酰基转移酶基因家族的一个成员。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。





泛素-蛋白酶体通路在植物---反应(包括反应)中发挥重要作用,泛素连接酶(ubiquitin ligase, e3)则是参与这一过程的重要组分。本研究旨在通过和分析与马铃薯晚疫病抗性相关的泛素连接酶家族中的成员,初步揭示这类基因在马铃薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的调控作用,或它们在马铃薯防御晚疫病菌侵染的信号传导网络中的作用,为进一步深入开展抗性机理研究奠定基础。 本实验室从晚疫病---的马铃薯水平抗性材料构建的cdna---中筛选出两个与avr9/cf-9 rapidly elicited protein (acre,具有泛素连接酶e3活性)基因有---同源性的est片段(10-a12和08-e12)。本研究中,我们了这两个est片段所代表的基因,strfp和stpub,并研究了其生物学功能。 strfp基因的全长cdna为1354 bp,包含一个789 bp的开放阅读框(orf),编码262个---酸,含有高度保守的ring-h2型ring指结构域、跨膜结构域和gld结构域,是一个新的马铃薯atl (arabidopsis toxico para levadura)蛋白。strfp基因位于马铃薯第3条染色体上,不含内含子。马铃薯基因组中可能有1-2个strfp基因拷贝或与之同源性高的基因。利用洋葱表皮细胞进行的strfp-gfp融合蛋白亚细胞定位结果显示,strfp在细胞膜上或膜外表达。
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