武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。
以nhd_3、nc、nf三种马铃薯品种的茎段为外植体,筛选出---形成愈伤组织的培养基,探讨不同转化条件对马铃薯遗传转化效率的影响。结果表明:在1.0 mg·l~(-1) 6-ba浓度不变情况下,愈伤---培养基中nhd_3、nc、nf茎段分别在naa浓度为0.2、0.3、0.4 mg·l~(-1)时愈伤形成及生长;在茎段预培养2 d,共培养2d,农菌液在od_(600)=0.6的条件下转化所得抗性愈伤---率。
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canz是can(calcineurin)基因的正义表达基因,是在真核生物中存在的一个ca2+及cam依赖的ser/thr蛋---酸酶,它包括一个催化亚基calcineurin a和一个ca2+结合亚基calcineurin b,其催化亚基calcineurin a活性受cam调节。本实验在筛选再生体系基础上,利用带有信号肽和cam结合肽的载体,以农为媒介将can基因导入中,预期过表达的融合蛋白将会被分泌到细胞外并与质外体cam相结合,抑制质外体cam的功能,从而构建出质外体cam的反义植株,观察质外体cam反义植株的表型改变,为进一步开展cam在植物生长发育过程中的功能研究提供基础。 研究结果如下: (1)以14-16d叶片为外植体,以ms为基本培养基,通过附加配方对比,亚细胞定位找哪里,筛选出适合材料再生的培养基配方:ms+iaa 0.5mg·l-1+6-ba 1.5mg·l-1为芽分化的培养基,1/2ms+naa0.1mg·l-1为生根培养基。 (2)用kan进行叶片抗性筛选。当kan浓度小于50mg·l-1时,叶片能正常分化出芽;当kan浓度为75mg·l-1时,叶片大多数白化;当kan浓度超过100mg·l-1时,芽分化停止。所以,以kan浓度100mg·l-1为叶片分化芽抗性筛选的临界浓度;而培养物根对较为敏感,kan 50mg·l-1为筛选临界值。
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