武汉思特进科技发展有限公司提供亚细胞定位-武汉思特进科技公司。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。
gamyb2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因枪轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共---显微镜下进行观察,从图a 中可以看出对照gfp空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图b 中发现gamyb2-gfp 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。
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目的研究1个白木香倍半萜合酶(ass)的亚细胞定位,确定其功能区域,亚细胞定位,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣。方法从白木香愈伤组织中提取总rna,采用特异引物rt-pcr方法倍半萜合酶ass基因,并连接于pezs-nl载体和pfgc5941gfp改造载体上,分别构建pfgc5941-gfp-ass、pezs-nl-ass-gfp 2种植物表达载体,分别利用根癌农侵染叶片、基因枪轰击洋葱表皮细胞、peg转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共---显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(gfp)融合蛋白的亚细胞定位。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ass基因与gfp的融合蛋白产物在叶片中定位于胞质,在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核,白木香原生质体中定位于胞质和质体。结论 ass基因在白木香原生质体胞质及质体定位;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞定位可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。
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多胺作为一种多聚阳离子,在基因表达、蛋白活性等多层面调节细胞功能。多胺转运蛋白能够特---介导多胺类物质跨膜运输,在调节多胺浓度、调控抗性基因表达、维持mrna水平、增强植物抗逆性等方---有重要功能。目前,已知拟南芥(arabidopsis thaliana)lhr1基因编码质膜多胺转运蛋白atput3,控制多胺的吸收,参与植物热---早期反应中的分子调控过程,但水稻中(oryza sativa),多胺参与植物热---早期反应的具体分子机制尚不明确。通过序列对比,发现水稻os02g47210和os03g37984是拟南芥atput3的功能同源基因。为了初步阐明水稻多胺转运蛋白lhr1在热---早期防御反应及提高植物耐热性上的功能,本研究利用生物信息学、生化与分子生物学实验、遗传学等手段对水稻lhr1同源基因的功能进行初步研究,结果如下:1.了水稻oslhr1(os03g37984.1、2、3和os02g47210)基因全长cds,并对该基因编码的蛋白质进行有效的生物信息学分析,结果显示:os03g37984有5种不同的剪切方式,编码5种osput3蛋白。
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